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不同類型的高效液相色譜柱應(yīng)該如何清洗?

更新時間:2020-06-01        閱讀:2303
  高效液相色譜柱是色譜儀的重要組成部分,其主要是由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾個部分組合而成的。該色譜柱是消耗品,會隨使用時間或進樣的次數(shù)增加,出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰,柱效下降。需要定期進行*清洗和再生,不同的高效液相色譜柱清洗方法各不相同。下面我們就一起來看看具體的步驟吧!

  不同類型的高效液相色譜柱應(yīng)該如何清洗?
  1、離子交換柱:長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
  2、正相柱:分別用正己烷(HPLC級),異丙醇(HPLC級),二氯甲烷(HPLC級),甲醇(HPLC級)等溶劑做流動相,順次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高)注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷,所有的流動相必須嚴格脫水。
  3、反相柱:常用方法:分別用甲醇:水=90:10,純甲醇(HPLC級),異丙醇(HPLC級),二氯甲烷(HPLC級)等溶劑作為流動相,依次沖洗,每種流動相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積.然后再以相反的次序沖洗。
  另外,還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復(fù)到新柱的水平的.如果柱子裝反了,可以調(diào)回來,但可能會造成柱內(nèi)擔體塌陷。在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。

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